產氣莢膜梭菌為厭氧型革蘭氏陽性產芽孢的桿狀菌,廣泛分布于環境,在人的腸道內也有發現。在自然界的大量水體中,產氣莢膜梭菌也存在,產生芽孢,并對污水處理措施和溫度具有抵抗力。產氣莢膜梭菌數量與水污染程度有一定的相關關系,因而也被認定是反映水質的一種指示菌。我國《食品安全國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法》GB8538—2016規定,天然礦泉水產品和水源水需檢測產氣莢膜梭菌。在該國標中,的分離培養基為亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂(簡稱SPS),但早有文獻報道,用該培養基經24h厭氧培養后產氣莢膜梭菌的黑色菌落產生不明顯,容易產生漏檢1。
上推薦的還有一款分離培養基為M-CP培養基。M-CP培養基初是由Bisson 和Cabelli兩個微生物學家描述的,用于快速鑒定海水、飲用水和污水中的產氣莢膜梭菌2。它被歐洲理事會指令98/83/EC中推薦用于人飲用水的水質檢測,方法為膜過濾法3。
HiMedia生產的一款梭菌選擇性顯色培養基(貨號M1354)即M-CP培養基。M是膜過濾法的英文個字母,CP是產氣莢膜梭菌的英文簡稱。它用于水質微生物檢測中,產氣莢膜梭菌的快速分離和初步鑒定。該培養基對于產氣莢膜梭菌具有更好的回收率,可用于監測各種類型的水體,包括氯消毒過的水、工業廢水等。
培養基中的L-鹽酸半胱氨酸為還原劑,溴甲酚紫為pH指示劑。培養基中的吲哚β-D-葡萄糖苷為顯色底物,而二磷酸酚酞用于檢測酸性磷酸化酶。添加的D-環絲氨酸和多粘菌素B(FD153)抑制伴隨的其他菌群。用該培養基厭氧培養44 ± 1°C,21 ± 3小時即可觀察結果。當黃色菌落在暴露于氨煙30秒后變為玫瑰紅時,即可認為是產氣莢膜梭菌。還可挑取典型菌落和非典型菌落(綠色或未變色菌落)進行進一步的驗證。
M-CP培養基中所用的顯色劑吲哚β-D-葡萄糖苷濃度后來進行調整,濃度降低為60mg/L而不影響其靈敏度 4,這使得整個培養基的價格下降,因而能普遍使用。
HiMedia公司是微生物產品生產商,一直致力于微生物培養基和細胞培養基的研發和生產,具有WHO GMP認證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認證,CE認證和FDA注冊登記,尤其通過CE的體外診斷注冊。其產品行銷140多個國家。
締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在微生物培養和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。
參考文獻
1. 潘寶怡,等. 飲用天然礦泉水中產氣莢膜梭菌檢測國標方法的改進. 現代食品科技.2012,28(9):1236
2. Bisson, J.W., and Cabelli, V.J., 1979, Membrane filter enumeration method for Clostridium perfringens: Applied and Environmental Microbiology, v. 37. . p. 55-66
3. E.U. (1998) 98/83/EC of Council of 3rd of November 1998 on the quality of water intended for human consumption. Off. J. Eur. Commun., L330, 32-54
4. Armon, R., and Payment, P., 1988, A modified m-CP medium for enumerating Clostridium perfringens from water samples: Canadian Journal of Microbiology, v.34. p.78-79.