支原體(mycoplasma)是一種沒(méi)有細(xì)胞壁的最小原核細(xì)胞。在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,支原體污染率達(dá)到60%以上,當(dāng)細(xì)胞(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染后,細(xì)胞內(nèi)的DNA、RNA及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,污染嚴(yán)重時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變,并出現(xiàn)細(xì)胞病變。因而細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,防止支原體污染是一個(gè)世界性的難題。
支原體污染細(xì)胞后很難察覺(jué),同時(shí)若細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程受到了支原體污染,*清除支原體也是非常困難的。因此在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,定期進(jìn)行支原體檢測(cè),在源頭上清除支原體污染,并做好支原體預(yù)防工作顯得尤為重要。
由于支原體直徑較小,經(jīng)常可以穿過(guò)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)的0.20微米孔徑的除菌濾膜,高壓過(guò)濾時(shí),甚至可以穿過(guò)0.10微米孔徑的除菌濾膜,造成細(xì)胞的支原體污染。細(xì)胞培養(yǎng)的支原體污染來(lái)源主要有:(1)細(xì)胞之間的交叉污染,這是支原體污染的最主要原因;(2)細(xì)胞培養(yǎng)操作人員的口腔、皮膚等。(3)細(xì)胞培養(yǎng)用的組分,如血清、培養(yǎng)液等;
試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器、門(mén)把手、電話等細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境被支原體污染,可引起細(xì)胞的污染。應(yīng)定期對(duì)工作區(qū)域進(jìn)行消毒。本文締一生物為您分析實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域中支原體祛除的方法。
常用以下三種方法:
Mycoplasma OffTM是一款支原體噴霧劑,用于清除工作區(qū)域中的支原體。它起效快(10秒鐘即起效),安全無(wú)毒,對(duì)細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生不良影響,噴灑后,可再用干凈紙張擦拭即可。對(duì)于工作臺(tái)以及各種細(xì)胞操作的器具表面,均可使用。如果是需要避免沾染液體的電子設(shè)備,可使用Mycoplasma OffTM濕巾擦拭。
細(xì)胞孵箱、水浴鍋等有溫水的地方,也容易滋生支原體、細(xì)菌等。在循環(huán)水中倒入Water ShieldTM(1:200稀釋)即可有效地預(yù)防滋生,效果可持續(xù)1個(gè)月左右。
Mycoplasma OffTM對(duì)許多細(xì)菌、病毒也有預(yù)防和殺滅作用。