在細胞實驗過程中,不僅要預防細菌污染,還有注意避免發生真菌污染。
細胞被真菌污染后,細胞生長狀態變化會發生改變。細胞生長速度通常會變慢。這是因為真菌會與細胞競爭營養物質,同時可能產生對細胞有害的代謝產物。形態變化:雖然真菌污染初期細胞形態可能不會有明顯變化,但隨著污染的加重,細胞可能會因為營養耗盡和毒性作用而逐漸脫落死亡。
真菌污染會嚴重影響細胞培養實驗的準確性和可靠性,導致實驗數據失真,甚至可能導致整個實驗失敗。如果污染嚴重且未及時處理,可能會導致寶貴的細胞株丟失并在實驗室造成交叉污染,給科研工作帶來巨大損失。
在日常培養細胞的過程中,可以預防性添加細胞真菌抑制劑,來對細胞進行保護,以德國MB公司的Funox®為例,該試劑是一種用于培養基的添加劑,其中含有納他霉素,納他霉素是一種天然存在的抗菌劑,可保護細胞培養物免受各種常見真菌和酵母污染物的侵害。
Funox®的使用方法:
建議在兩種不同的濃度下使用該產品:
1、用于預防的細胞培養基添加劑:
將 1 ml Funox® 添加到一批 500 ml 完整的即用型細胞培養基中(1:500 稀釋終濃度 10 μg/ml 作為預防性產品進入細胞培養物中)
2、消除細胞培養基處理(在污染的早期階段):
a) 將 2.5 ml Funox® 加入 500 ml 新鮮制備的細胞培養基中。
b) 通過分流或更換培養基,用含有 Funox® 的全培養基替換污染細胞培養物的培養基(1:200 稀釋,終濃度 25 μg/ml,以消除現有的真菌污染)
我們建議在污染晚期階段的情況下丟棄細胞培養物。