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實驗室使用O157顯色培養(yǎng)基，是如何操作的

更新時間：2021-12-24  |  點擊率：891
 　O157顯色培養(yǎng)基的操作步驟：
　　1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；
　　2、取25克樣品液加入225mlmEC肉湯或mTSB肉湯中，36℃增菌培養(yǎng)18-24小時；
　　3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上，做2個平板；
　　4、36℃培養(yǎng)18-24h，O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色，菌落周圍沒有藍(lán)色暈圈；大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍(lán)色、藍(lán)色或紫色，菌落周圍有藍(lán)色暈圈；其它細(xì)菌顯藍(lán)色、黃色或無色；
　　5、對典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗和全套生化試驗。
　　注：必須在36℃培養(yǎng)24小時內(nèi)判讀結(jié)果，以免菌落顏色發(fā)生變化。
　　操作
　　稱取瓶內(nèi)干粉，用1000ml蒸餾水或純水溶解，可按29.2g/L的比例擴(kuò)大或縮小。
　　將上述干粉緩慢倒入蒸餾水中，充分?jǐn)嚢枞芙狻?/div>
　　加熱至100℃，并按常規(guī)不斷攪拌。如果用高壓滅菌鍋，不要加壓，加熱不能超過100℃。混合物也可以在微波爐內(nèi)加熱，煮沸后，立即移出微波爐并輕輕攪拌，而后再移入微波爐繼續(xù)加熱，直至瓊脂等*溶解（大量氣泡代替泡沫產(chǎn)生，大約需要2分鐘）。
　　將培養(yǎng)基冷卻至45-50℃后，傾倒于培養(yǎng)皿或試管中。
　　注1：如果需要選擇性更強(qiáng)的培養(yǎng)基，可在48℃時加入亞碲酸鉀溶液，使?jié)舛葹?.5mg/l。
　　注2：如果標(biāo)本中含有較多的變形桿菌，可在48℃時加入頭孢克肟，使其濃度為0.025mg/l。
　　注3：如果標(biāo)本中含有較多的假單胞菌和/或氣單胞菌，可在48℃時加入西蘇羅錠（頭孢磺碇），使其濃度為5mg/l。